Vsebina
- Navodila
- Priprava materialov
- Dajanje spor na plošče
- Izolacija čiste kulture
- Priprava potomcev
- Nacrtovanje substrata za rast gob
- Kako
- Obvestilo
- Kaj potrebujete
Gobe lahko gojimo iz spore ali kulture tkiv. Spore kulture povzročajo populacije genetsko različnih gob. Uporaben je pri izoliranju in testiranju novih sevov. Postopki za razvoj gob so specifični za posamezne vrste. Predpostavlja se, da proizvajalec ve, kako gojiti gob, ki je v interesu, zlasti ko je dobil dovolj potomcev.
Navodila
Zbirka Agaricus gob (Fotografije Iana Granta, Jasona Hollingerja)-
Pripravite 500 do 1000 ml MEA v skladu z navodili proizvajalca.
-
Raztopino natrijevega klorida prenesemo v epruvete in MEA v erlenmajerico. Cev in vial ne polnite več kot do polovice in rahlo prekrivajte.
-
Raztopino natrijevega klorida, MEA in petrijevke (če ni sterilna) sterilizirajte v loncu pod tlakom pri 121 stopinjah Celzija in 1 atm za 15 do 20 minut.
-
Odstranite MEA, raztopino natrijevega klorida in petrijevke iz lonca pod pritiskom in pustite, da se ohladi.
-
Ko se MEA dovolj ohladi, da se z njimi ravna, vendar pred strditvijo, dvignite pokrov z vsake pozornosti petrijevke in nalijte 10 do 20 ml staljenega MEA.
-
Pustite, da se plošče MEA in natrijevega klorida ohladijo na sobno temperaturo.
Priprava materialov
-
Kljuko sterilizirajte v alkoholni svetilki. Pustite, da se žica segreje, dokler ne postane rdeča, in pustite, da se ohladi za 5 sekund.
-
Kavelj potopite v raztopino natrijevega klorida, da zberete kapljico tekočine. Padec porazdelite po majhnem območju v vtis spore (ali drugega vira spore), da ustvarite mešanico tekočine / spore. Ta postopek ponovite večkrat in sterilizirajte kavelj med seboj.
-
Kavelj potopite v suspenzijo natrijevega klorida in spore, da zbirate spore.
-
Dvignite pokrov plošče agarja ravno toliko, da omogočite dostop do kljuke.
-
Razpršite suspenzijo spor iz kljuke na površino agarja in ponovno vzemite ploščo. Ponovite toliko kart, kot želite (vsaj pet ali šest).
-
Agar plošče zaprite s plastično folijo, da preprečite suhost. Inkubirajte spore pri ustreznih temperaturah in svetlobnih pogojih za vrsto.
-
Opazujte znake vsakih nekaj dni in iščite znake kalivosti. Bela puhasta rast (micelij) na površini agarja kaže na prisotnost glivice (vendar ne sme biti gliva, ki je zrasla iz spore).
Gojenje gob iz spore
Dajanje spor na plošče
-
Primerjajte micelij z objavljenimi opisi micelija, ki ga poskušate rasti.
-
Če je micelij videti pričakovan, kulturo očistite tako, da izrežete koščke in jih prenesete na sveže agarske plošče.
-
Še naprej odrežite koščke od konice razširjenih kolonij, dokler čista kolonija ni brez bakterij.
Izolacija čiste kulture
-
Izrežemo in prenesemo dele očiščenega micelija v sterilizirane kozarce vlaken ali substrat lesnih sekancev. Vrsta uporabljenega substrata je odvisna od vrste gob.
-
Inkubirajte glavni micelij v razmerah, primernih za vrsto, dokler substrat ni popolnoma koloniziran z micelijem.
-
Pretresite posode z micelijem redno, da bi razdelili substrat in pospešili kolonizacijo.
-
Uporabite glavni micelij za inokulacijo drugih posod in proizvedite več micelija.
Priprava potomcev
-
Stekleničke micelija močno pretresite, da jih fragmentirate.
-
Mikelij postavite v vrečke ali pladnje za substrat za rast gob.
-
Previdno premešajte micelij na substratu, mešajte ali mešajte.
-
Nadaljujte v skladu z objavljenimi metodami o tem, kako gojiti micelij in začnete proces pridelovanja vrst, ki se gojijo.
Nacrtovanje substrata za rast gob
Kako
- Hitro delujte, ko nalijete agar ali prenesete inokulum, da zmanjšate kontaminacijo.
- Čas in napor je mogoče prihraniti z nakupom sterilnih in vnaprej pripravljenih agar plošč.
- MEA je dober splošni medij za gojenje gob, toda druga vrsta medija je lahko bolj primerna glede na vrsto.
Obvestilo
- Tlačni kuhalniki se lahko segrejejo in povzročijo poškodbe. Upoštevajte navodila proizvajalca za vzdrževanje in uporabo.
- Sterilizirane posode so vroče in z njimi je treba ravnati z rokavicami, ki so odporne na toploto, da se preprečijo opekline in razlitja.
- Pokrov posode naj bo steriliziran, da se med postopkom ogrevanja in hlajenja izenači tlak.
- Vse posode, ki jih je treba sterilizirati, morajo biti izdelane iz materiala za avtoklaviranje.
Kaj potrebujete
- Spore gob
- Agar iz ekstrakta slada (MEA)
- Petrijevke (krožniki)
- Podlaga primerna za vrste
- Alkoholna svetilka
- Kačica za inokulacijo
- Raztopina natrijevega klorida (0,9% W / V)
- Tlačni lonec
- Preskusne cevi
- Erlenmajerici
- Plastična folija
- Plovila ali vreče za proizvodnjo micelija