Vsebina
- Pomanjkljivosti tehnike pretočne citometrije
- Nizka stopnja pretoka celic
- Potreba po visoko usposobljenih operaterjih
- Pretočni citometri so dragi
Pretočna citometrija, tehnika, ki lahko pomaga pri karakterizaciji mikroskopskih delcev, kot so celice in kromosomi, omogoča hkratno analizo fizikalnih in kemijskih lastnosti tisoč delcev na sekundo in več različnih znanstvenih parametrov. Ločevanje celic s fluorescenco, ki je specializirana oblika pretočne citometrije, lahko tudi loči heterogeno mešanico celic na dva ali več sevov glede na njihove lastnosti odbijanja fluorescentne svetlobe. Instrumenti, ki temeljijo na tem konceptu, so izjemno zmogljiva znanstvena naprava, ki se uporablja v raziskovalnih in mikrobioloških laboratorijih za fizično ločevanje celic. Ta tehnika je uporabna tudi pri diagnosticiranju bolezni, kot je levkemija (rak krvi).
Pomanjkljivosti tehnike pretočne citometrije
Vendar pa je uporaba te znanstvene tehnike resno omejena. Ker se rezultati pretočne citometrije analizirajo na agregatni ravni, ni enostavno opazovati in meriti vedenja posameznih celic. Poleg tega, ker ta tehnika zahteva prehod celic skozi tok tekočine, omejuje analizo le na suspendirane celične raztopine. Iz istega razloga je treba tkivne celice ločiti od tkiva, kar naredimo z obdelavo nedotaknjenih tkiv z encimom, ki te celice poudari za nadaljnjo analizo.
Nizka stopnja pretoka celic
Ena največjih slabosti pretočnih citometrov je njihov majhen pretok celic. Tudi pri hitrih separatorjih je hitrost manjša od nekaj tisoč celic na sekundo. Številni poskusi pa zahtevajo veliko število celic. Tako morajo tudi visokohitrostni separatorji delovati dolgo časa, kar ni samo drago, ampak lahko povzroči tudi težave s kakovostjo, ker te celice, ki so prešle skozi zelo dolge procese, morda ne bodo več uporabne v poskusih. Ta težava se lahko poslabša, kadar morajo biti ločene celice v sterilnem okolju. Čeprav lahko hitrostni pretočni citometri zagotavljajo sterilne celice, je to postopek bolj zapleteno in zmanjšuje pretok.
Potreba po visoko usposobljenih operaterjih
Ker je pretočni citometer zelo izpopolnjena naprava, lahko z njim upravlja samo usposobljeno in visoko usposobljeno osebje ter z opremo doseže sprejemljivo raven.
Pretočni citometri so dragi
Pretočni citometri so dragi instrumenti za nakup in vzdrževanje. Laserski pretočni citometer, ki lahko analizira samo brez ločevanja, stane skoraj 200.000 R $, medtem ko citometer na osnovi svetilk stane malo manj, približno 150.000 R $. Pretočni citometri z dodano zmožnostjo ločevanja celic lahko stanejo skoraj dvakrat več kot njihove cenejše različice. Poleg tega je ločevanje z visoko hitrostjo še en ponavljajoč se strošek, ki običajno stane na tisoče realov za vsako uporabo.