Vsebina
PCR je metoda, ki jo uporabljajo znanstveniki za izdelavo milijonov kopij segmenta DNA. Polimeraze - vrsta beljakovinskega encima - pomagajo pri pridobivanju novih segmentov. Znanstveniki pogosto uporabljajo Taq polimerazo v PCR.
Zgodovina
Taq polimeraza prihaja iz bakterije Thermus aquaticus, ki živi v termalnih vodah. Kary Mullis in Fred Faloona sta v sredini osemdesetih let prejšnjega stoletja razvila PCR s prvotno polimerazo Escherichia coli, vendar so znanstveniki kmalu začeli uporabljati Taq v PCR, ker je bila bolj odporna na visoke temperature.
Funkcija
PCR vključuje korake denaturacije, žarjenja in replikacije, ki se ponavadi ponavljajo 20 do 30-krat. Denaturacija ločuje dvojni del DNK v izolirane niti. V stopnji žarjenja se primerji vežejo na segmente DNA, ki jih je treba kopirati. Taq polimeraza začne delovati na stopnji replikacije: polimeraza združuje iz vsake posamezne verige DNA, označene s primerjem, novo dvojno verigo.
Koristi
Visoke temperature, potrebne za denaturacijo DNA, so uničile E. coli polimerazo, ki je bila prvotno uporabljena v PCR, zato je bilo treba vsakemu ciklu dodati dodaten encim. Taq polimeraza lahko prenese te temperature, tako da lahko znanstveniki sedaj izvedejo več ciklov PCR samodejno.
Premisleki
Taq polimeraza ima relativno visoko stopnjo podvojitve DNA. Druge stabilne polimeraze pri visokih temperaturah imajo nižje stopnje napak, vendar se Taq zaradi svoje zanesljivosti in vsestranskosti še vedno najbolj uporablja.