Vsebina
- Plošče bakterijskega agarja
- Polnjenje agarnih plošč
- Shranjevanje agarnih plošč
- Obračanje agar plošč med shranjevanjem
- Obračanje agarnih plošč med inokulacijo in inkubacijo
Agar plošče uporabljajo znanstveniki v celični in molekularni biologiji za izvajanje raziskovalnih poskusov. To so plastične petrijevke, napolnjene z agarjem, pomešanim s hranili, ki omogočajo rast različnih mikroorganizmov, kot je bakterija E. coli. V laboratorijih se obravnavajo kot skupni potrošniški material, ker se uporabljajo hitro in običajno notranje, v velikih serijah in nato shranjeni.
Plošče bakterijskega agarja
Te plake običajno proizvajajo znanstveni tehniki, ki vsebujejo laboratorijski agar v bakterijskem gojišču kulture, kot sta Luria-Bertani, SOC, Terrific ali metilen modri eozin. Priprava agarskega gojišča kulture dopolnjujejo drugi dejavniki, ki so lahko potrebni za preživetje bakterij ali specifičen antibiotik (npr. Ampicilin ali kanamicin), da se prepreči rast neželenih bakterij.
Polnjenje agarnih plošč
Agar plošče pripravimo s preprosto mešanjem kombinacije hranil in agarja z uravnoteženo pH slano raztopino in jih segrevamo, dokler se ne stopijo. Ko se rahlo ohladi, se dodajo toplotno občutljivi dodatki. Ta mešanica se vlije, medtem ko je še vedno topla (in zato utekočinjena) na dnu vsake petrijevke; posuši se in strdi na površini, na katero se lahko dajo bakterijske suspenzije. Ko se plošče popolnoma ohladijo, se označijo in shranijo do uporabe. Ustrezno shranjevanje agarnih plošč je pomembno za zagotovitev, da so prave bakterije kultivirane in da ne pride do neželene kontaminacije, ki bi lahko vplivala na eksperimentalne rezultate.
Shranjevanje agarnih plošč
Na voljo je več načinov shranjevanja agarnih plošč, odvisno od tega, katere dodatke vsebujejo. Če so na voljo lahki dodatki, se plošče shranijo v temi, zavijejo v folijo ali hranijo v svetlobnem vsebniku. Plošče so vedno shranjene v hladilniku ali laboratorijskem hladilniku pri 4 stopinjah Celzija ali 39,2 stopinje Fahrenheita. Hlajenje lahko prepreči ali zmanjša rast neželenih bioloških onesnaževalcev.
Obračanje agar plošč med shranjevanjem
Neuporabljene plošče so med shranjevanjem vedno obrnjene ali obrnjene na glavo. To se stori, da se prepreči izhlapevanje, če se plak shranjuje dolgo časa, kar lahko vpliva na učinkovitost rasti bakterij ali omogoči razmnoževanje neželenih organizmov, kot so plesni.
Obračanje agarnih plošč med inokulacijo in inkubacijo
Ko so plaki napolnjeni z vlažno suspenzijo bakterij, jo je treba pustiti, da se izhlapi pred inkubacijo čez noč. Vendar bo še vedno prisotna zmerna količina vlage. Če plaka med inkubacijo ni obrnjena, se bakterije ne bodo mogle pravilno pritrditi na agar, kar bo bodisi preprečilo njihovo gojenje in tvorilo kolonije na ustrezen način ali spodbudilo rast nezaželenih mikroorganizmov. Vsak od teh rezultatov bo oviral poskus. Poleg tega lahko kakršna koli kondenzacija ali vlaga povzroči točkovanje, zaradi česar je zelo težko izbrati in analizirati ločene kolonije. Ko bakterije tvorijo kolonije, se plaketa shrani tudi z glavo navzdol, da se ohrani nivo vlage.